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一种鹰嘴豆多肽部位的制备方法及其应用

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[0033] 图1为本发明多肽部位的液相图;
[0034] 图2为本发明多肽部位的质谱图;
[0035] 图3为本发明多肽部位的液质谱图;
[0036] 图4为本发明多肽抗的白色念珠菌活性图;
[0037] 图5为本发明多肽抗金黄色葡萄球菌活性结果图;
[0038] 图6为本发明多肽抗大肠埃希氏菌活性结果图;
[0039] 图7为本发明SDS-PAGE电泳图谱;
[0040] 图8为本发明SDS-PAGE电泳图谱。
【具体实施方式】
[0041] 实施例1
[0042] 鹰嘴豆豆瓣多肽粉的制备:
[0043] a、取鹰嘴豆发芽除牙之后的豆瓣,用水冲洗3次至完全干净,分别用纱布过滤,合 并清洗后的鹰嘴豆豆瓣,低温干燥,控制温度在40°C,将干燥后的鹰嘴豆豆瓣,经粉碎机粉 碎,粉碎粒度为200目,按料液重量比为1 : 5加入石油醚,在室温下搅拌1小时,反复提取 3次至未有油脂提取出来为止,抽滤,合并沉淀,自然干燥至未有石油醚溶剂残留为止,得到 脱脂的鹰嘴豆粉;
[0044] b、将步骤a中充分脱脂的鹰嘴豆粉中加入浓度为50%食用乙醇,料液比为1 : 5, 在室温下搅拌提取2小时,每次提取3次,减压抽滤,合并提取液,分离杂物,得到多肽粗提 取溶液备用;
[0045] c、将步骤b中得到的多肽粗提取溶液,利用蒸馏水稀释至乙醇浓度为10%,将稀 释的提取溶液,上已用10 %的乙醇,流速为3毫升/MIN,在UV-280匪下进行洗脱平衡好的 反相C18硅胶柱,再用浓度为50%乙醇洗脱,得到粗多肽部位:
[0046] d、将步骤c得到的粗多肽部位利用旋转蒸发仪浓缩至无乙醇溶液残留后,采用截 留分子量为lKDa的再生纤维素平板膜,浓缩过程中压力0. 15MPa,温度25°C,流速35m/s, 浓缩倍数为5-10倍,得到鹰嘴豆多肽浓缩物,依次经过离心,喷雾干燥,过筛,紫外灭菌,包 装,即可得到鹰嘴豆多肽粉。
[0047] 实施例2
[0048] a、取干燥的有机溶剂提取小分子化合物后的鹰嘴豆渣,粉碎后,粉碎粒度为200 目,按料液重量比为1 : 5加入石油醚,在室温下搅拌2小时,反复提取4次至未有油脂提取 出来为止,抽滤,合并沉淀,自然干燥至未有石油醚溶剂残留为止,得到脱脂的鹰嘴豆粉;
[0049] b、将步骤a中充分脱脂的鹰嘴豆粉中加入浓度为50%食用乙醇,料液比为1 : 5, 在室温下搅拌提取3小时,每次提取4次,减压抽滤,合并提取液,分离杂物,得到多肽粗提 取溶液备用;
[0050] C、将步骤b中得到的多肽粗提取溶液,利用蒸馏水稀释至乙醇浓度为20%,将稀 释的提取溶液,上已用20 %的乙醇,流速为3毫升/MIN,在UV-280匪下进行洗脱平衡好的 反相C18硅胶柱,再用浓度为80%乙醇洗脱,得到粗多肽部位:
[0051] d、将步骤c得到的粗多肽部位利用旋转蒸发仪浓缩至无乙醇溶液残留后,采用截 留分子量为lKDa的再生纤维素平板膜,浓缩过程中压力0. 15MPa,温度25°C,流速35m/s, 浓缩倍数为5-10倍,得到鹰嘴豆多肽浓缩物,依次经过离心,冷冻干燥,过筛,紫外灭菌,包 装,即可得到鹰嘴豆多肽粉。
[0052] 实施例3
[0053] 鹰嘴豆豆瓣多肽粉的制备:
[0054] a、取鹰嘴豆发芽除牙之后的豆瓣,用水冲洗3次至完全干净,分别用纱布过滤,合 并清洗后的鹰嘴豆豆瓣,低温干燥,控制温度在40°C,将干燥后的鹰嘴豆豆瓣,经粉碎机粉 碎,粉碎粒度为200目,按料液重量比为1 : 5加入石油醚,在室温下搅拌2小时,反复提取 4次至未有油脂提取出来为止,抽滤,合并沉淀,自然干燥至未有石油醚溶剂残留为止,得到 脱脂的鹰嘴豆粉;
[0055]b、将步骤a中充分脱脂的鹰嘴豆粉中加入浓度为50%食用乙醇,料液比为1 : 5, 在室温下搅拌提取3小时,每次提取4次,减压抽滤,合并提取液,分离杂物,得到多肽粗提 取溶液备用;
[0056] c、将步骤b中得到的多肽粗提取溶液,利用蒸馏水稀释至乙醇浓度为20%,稀释 的提取溶液,上已用20%的乙醇,流速为3毫升/MIN,在UV-280匪下进行洗脱平衡好的反 相C18硅胶柱,并用浓度为60%乙醇洗脱,得到粗多肽部位:
[0057] d、将步骤c得到的粗多肽部位利用旋转蒸发仪浓缩至无乙醇溶液残留后,采用截 留分子量为lKDa的再生纤维素平板膜,浓缩过程中压力0. 15MPa,温度25°C,流速35m/s, 浓缩倍数为5-10倍,得到鹰嘴豆多肽浓缩物,依次经过离心,冷冻干燥,过筛,紫外灭菌,包 装,即可得到鹰嘴豆多肽粉。
[0058] 实施例4
[0059] 鹰嘴豆豆渣多肽粉的制备:
[0060] a、取干燥的有机溶剂提取小分子化合物后的鹰嘴豆渣,经粉碎机粉碎,粉碎粒度 为200目,按料液比为1 :5加入石油醚,在室温下搅拌1小时,反复提取3次至未有油脂提取 出来为止,抽滤,合并沉淀,自然干燥至未有石油醚溶剂残留为止,得到脱脂的鹰嘴豆粉;
[0061] b、将步骤a中充分脱脂的鹰嘴豆粉中加入浓度为50%食用乙醇,料液比为1 : 5, 在室温下搅拌提取2小时,每次提取3次,减压抽滤,合并提取液,分离杂物,得到多肽粗提 取溶液备用;
[0062] c、将步骤b中得到的多肽粗提取溶液,利用蒸馏水稀释至乙醇浓度为10% -20%, 稀释的提取溶液,上已用10%的乙醇,流速为3毫升/MIN,在UV-280匪下进行洗脱平衡好 的反相C18硅胶柱,并用浓度为50%乙醇洗脱,得到粗多肽部位:
[0063] d、将步骤c得到的粗多肽部位利用旋转蒸发仪浓缩至无乙醇溶液残留后,采用截 留分子量为lKDa的再生纤维素平板膜,浓缩过程中压力0. 15MPa,温度25°C,流速35m/s,浓 缩倍数为5-10倍,得到鹰嘴豆多肽浓缩物,依次经过离心,再喷雾干燥,过筛,紫外灭菌,包 装,即可得到鹰嘴豆多肽粉。
[0064] 实施例5
[0065] 鹰嘴豆豆瓣多肽粉的制备:
[0066] a、取鹰嘴豆发芽除牙之后的豆瓣,用水冲洗3次至完全干净,分别用纱布过滤,合 并清洗后的鹰嘴豆豆瓣,低温干燥,控制温度在40°C,将干燥后的鹰嘴豆豆瓣,经粉碎机粉 碎,粉碎粒度为200目,按料液重量比为1 : 5加入石油醚,在室温下搅拌2小时,反复提取 4次至未有油脂提取出来为止,抽滤,合并沉淀,自然干燥至未有石油醚溶剂残留为止,得到 脱脂的鹰嘴豆粉;
[0067] b、将步骤a中充分脱脂的鹰嘴豆粉中加入50%乙醇,料液比为1 : 5,在室温下 搅拌提取2小时,每次提取3次,减压抽滤,合并提取液,分离杂物,得到多肽粗提取溶液备 用;
[0068] c、将步骤b中得到的多肽粗提取溶液,利用蒸馏水稀释至乙醇浓度为15%,将稀 释的提取溶液,上已用浓度为15 %的乙醇,流速为3毫升/MIN,在UV-280匪下进行洗脱平 衡好的反相C18硅胶柱,并用浓度为80 %乙醇洗脱,得到粗多肽部位:
[0069] d、将步骤c得到的粗多肽部位利用旋转蒸发仪浓缩至无乙醇溶液残留后,采用截 留分子量为lKDa的再生纤维素平板膜,浓缩过程中压力0. 15MPa,温度25°C,流速35m/s, 浓缩倍数为5-10倍,得到鹰嘴豆多肽浓缩物,依次经过离心,冷冻干燥,过筛,紫外灭菌,包 装,即可得到鹰嘴豆多肽粉。
[0070] 实施例6
[0071] 鹰嘴豆豆渣多肽粉的制备:
[0072] a、取干燥的有机溶剂提取小分子化合物后的鹰嘴豆渣,经粉碎机粉碎,粉碎粒度 为200目,按料液比为1 : 5加入石油醚,在室温下搅拌1.5小时,反复提取3次至未有油 脂提取出来为止,抽滤,合并沉淀,自然干燥至未有石油醚溶剂残留为止,得到脱脂的鹰嘴 豆粉;
[0073]b、将步骤a中充分脱脂的鹰嘴豆粉中加入浓度为50%食用乙醇,料液比为1 : 5, 在室温下搅拌提取3小时,每次提取3次,减压抽滤,合并提取液,分离杂物,得到多肽粗提 取溶液备用;
[0074] c、将步骤b中得到的多肽粗提取溶液,利用蒸馏水稀释至乙醇浓度为15%,将稀 释的提取溶液,上已用浓度为15 %的乙醇,流速为3毫升/MIN,在UV-2
文档序号 : 【 8441064 】

技术研发人员:阿布力米提·伊力,阿吉艾克拜尔·艾萨,艾合米丁·外力,肖凯提·萨利赫
技术所有人:中国科学院新疆理化技术研究所

备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
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阿布力米提·伊力阿吉艾克拜尔·艾萨艾合米丁·外力肖凯提·萨利赫中国科学院新疆理化技术研究所
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