南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种抗应激的复合中草药微生态制剂，具体涉及一种在南美白对虾抗 运输应激的中草药微生态制剂及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 南美白对虾又名凡纳滨对虾，俗称白对虾，南美白对虾与国内其他养殖对虾相比， 具有生长快、抗病能力强、适应盐度广等优点，是当今世界养殖虾类产量最高的三大品种 (中国对虾、斑节对虾、南美白对虾）之一。随着人们生活水平的提升，对虾由于其营养丰 富，肉质松软，易消化等特点，深受消费者的喜爱。
[0003] 为了提高对虾养殖的产量，现有的对虾养殖均采用集约化养殖、运输和销售。在现 有高产养殖模式下，对虾对外界环境的变化非常敏感，气候变化、养殖操作、药物的使用、采 食量过大等均可以不同程度上产生其对虾的应激。"应激"是水产动物一种常见的生理状 态，这是水产动物机体对外界环境或身体内产生异常刺激时做出的各种生理应激反应的总 和。处于应激状态的对虾通过各项生理作用，调动身体的每个器官来应对环境的突变。"应 激"消耗了大量的体能，体能下降了，免疫能力就会下降，容易引起对虾发生病害。
[0004] 在对虾运输过程中，对虾运输水体中的溶解氧、盐度、温度、酸碱度等水质因子的 急剧变化等不良水质均易诱发对虾的应激反应，此外，在对虾运输和销售的过程中由于养 殖密度多大，会使对虾产生拥挤应激。
[0005] 在高密度对虾运输过程中，对于环境等因素改变引起的应激损失也成为水产养殖 业不可忽视的问题，市面上目前尚未出现针对于对虾运输应激的生物制剂，因此开发一种 针对于南美白对虾运输用的天然、无污染的生物制剂非常重要，对于促进对虾运输的安全 性、提升对虾运输成活率具有重要意义。
【发明内容】
[0006] 针对以上不足，本发明的目的之一在于提供一种专门针对南美白对虾运输应激 的，能够提高南美白对虾运输抗应激能力，从而提高运输成活率的复合中草药微生态制剂。
[0007] 本发明通过以下方案达到上述目的：
[0008] 本发明的中草药微生态制剂是通过生物发酵技术，将微生物与中草药混合发酵制 成，是一种含有有效中草药活性组分、菌体及代谢产物的全组分发酵液。
[0009] -种南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂，包含以下重量份的原料制成： 五倍子22~26份、优选22份，杨树花14~21份、优选16份，龙胆草5~20份、优选18 份，黄岑10~15份、优选10份，五加皮5~10份、优选5份和发酵用菌株及液体培养基。
[0010] -种优选的南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂，包含以下重量份的原料 制成：五倍子22份，杨树花16份，龙胆草18份，黄岑10份，五加皮5份和发酵用菌株及液 体培养基。
[0011] 其中，上述发酵用菌株优选包含芽孢杆菌和光合细菌，经研宄证实，芽孢杆菌具备 高产纤维素酶的特性，且对于对虾常见的副溶血弧菌有较好的抑制作用；而光合细菌进一 步优选采用球形红假单胞菌，其代谢产物丰富，且本发明中上述中草药对其生长有明显促 进作用，该菌株的存在对于芽孢杆菌菌数的提升以及发酵液菌数的稳定有一定的促进作 用。可与本发明中上述中草药原料组分中的有效成分形成协同作用，同时该菌株还可在有 氧环境下进行异氧生长。
[0012] 其中，所述液体培养基可以为任何可用于上述中草药微生态制剂发酵培养的培养 基，优选为液体蜜糖，进一步优选为体积百分比为10-20%的液体糖蜜，优选为体积百分比 为10%的液体糖蜜，其余为水，其中，上述液体蜜糖培养基的pH进一步优选为7. 0。
[0013] 其中，上述中草药原料优选为粉状，例如经过粉碎后，进一步优选为经过超微粉碎 后的粉状。
[0014] 其中，上述粉状中草药原料占液体培养基的体积的体积百分比优选为15-25%。
[0015] 其中，上述芽孢杆菌的接种量优选占液体培养基体积的体积百分比为2-3%，更优 选为2 %，活菌数优选为2 X IO9-I X 101(lcfu/ml，更优选为2 X 109cfu/ml。
[0016] 其中，上述光合细菌接种量优选占液体培养基体积的体积百分比为4-5 %，更优选 为5 %，活菌数优选为3 X 108-5 X 108cfu/ml，更优选为3 X 108cfu/ml。
[0017] 其中，上述光合细菌可以为沼泽红假单胞菌，荚膜红假单胞菌，球形红假单胞菌， 优选为荚膜红假单胞菌，球形红假单胞菌，更优选为球形红假单胞菌。
[0018] 其中，上述中草药微生态制剂的活菌数或细胞数优选彡2 X 107cfu/ml。
[0019] 本发明的目的之二在于提供一种上述南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制 剂的制备方法，包括将中草药原料经发酵用菌株在液体培养基中液态发酵制备得到上述中 草药微生态制剂，其中，原料组分的选择及用量选用包括上述提及的所有南美白对虾抗运 输应激的中草药微生态制剂中的原料。
[0020] 进一步的，一种优选的制备上述南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂的方 法，包括：将中草药原料经粉碎后，优选超微粉碎后以占液体培养基体积百分比15% -25% 的量添加至液体培养基中，接种发酵用菌株，发酵，发酵结束后得到，进一步可以灌装或灌 装后密封更好，其中，原料组分的选择及用量选用包括上述提及的所有南美白对虾抗运输 应激的中草药微生态制剂中的原料。
[0021] 其中，上述发酵的参数优选控制为发酵温度为30-35°C，通气量IOjOLmirT1Jf 数：180-200r ? mirT1，发酵时间 24-36h。
[0022] 其中，上述制备方法优选控制该制备得到的中草药微生态制剂的活菌数或细胞数 彡 2X 107cfu/ml〇
[0023] 进一步的，一种更优选的制备上述的南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂 的方法，包括以下步骤：
[0024] (1)将中草药原料超微粉碎得到中草药原料粉剂，优选80%过100目筛或过200 目筛得到中草药原料粉剂；
[0025] (2)制备液体培养基，所述液体培养基包含水和液体蜜糖，其中，以占液体培养基 体积百分比计，液体蜜糖为10-20-%，优选10% ;
[0026] (3)将中草药原料粉剂以占液体培养基体积百分比15 % -25 %的量添加至液体培 养基中，接种发酵用菌株，发酵温度为30-35 °C，通气量IOjOLmirT1，转数：180-200r MirT1， 发酵时间24-36h ;
[0027] (4)发酵后处理：发酵结束后，得到菌体、中草药发酵液的混合物，即中草药微生 态制剂，进一步搅拌均匀后灌装或搅拌均匀后灌装密封更好得到，所述制剂的活菌数或细 胞数彡2X10 7cfU/ml，其中，原料组分的选择及用量选用包括上述提及的所有南美白对虾 抗运输应激的中草药微生态制剂中的原料。。
[0028] 本发明的发明目的之三在于提供一种应用上述南美白对虾抗运输应激的中草药 微生态制剂的方法，包括将上述中草药微生态制剂用于运输前和/或运输过程中，优选成 虾收虾前连续3天使用，每天1次，每次用量IL/亩米、或优选仔虾或成虾运输过程中使 用，每次用量50ml/m 3水体，通过这样的应用，能有效减缓机体对应激条件的反应，提升养殖 动物在运输过程中的耐受力，显著降低因运输过程应激引起的伤亡。
[0029] 中药发酵制剂技术是在继承中药炮制学发酵法的基础上，吸收了微生态学研宄成 果，结合现代生物工程的发酵技术而形成的中药新技术，是将中药活性成分、菌体以及代谢 产物的组合而成的新型发酵制剂，日前在制药等多领域成为研宄的热点。本发明的用于南 美白对虾抗运输应激的发酵中草药微生态制剂，就是利用现代生物发酵技术，将微生物与 中草药混合发酵制成，是一种含有有效中药活性成分、菌体及代谢产物的全组分发酵液，试 验证实，能有效缓解对虾在运输过程中的应激，提升养殖动物在运输过体中的耐受力，减少 对虾运输的伤亡，提高南美白对虾的运输成活率，具有显著的经济价值。
[0030] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0031] (1)本发明从虾体应激的角度，筛选了多种抗应激、抗病原菌中草药，得到的复合 中草药原料组分来源广泛、成本低廉、制备简单、且作用显著；
[0032] (2)本发明采用的发酵菌株，是经本实验室多年筛选得到的具备分解、分泌抗氧化 物质的有益菌株，不仅能大量释放中草药的活性成分，同时菌株本身对于虾病控制以及肠 道健康均有一定的改善作用；
[0033] (3)本发明所述的抗运输应激发酵中药制剂是专门针对于南美白对虾开发而成， 该微生态制剂的使用可显著降低对虾运输过程中出现的应激红体现象。
[0034] (4)经济价值明显，南美白对虾运输的成活率显著提高。
【具体实施方式】
[0035] 以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
[0036] 实施例1 :
[0037] 一种南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂，包含以下重量份的原料制成： 五倍子22~26份，杨树花14~21份，龙胆草5~20份，黄岑10~15份，五加皮5~10 份，以及发酵用菌株和液体培养基。
[0038] 实施例2 :
[0039] 一种南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂，包含以下重量份的原料制成： 五倍子22~26份，杨树花14~21份，龙胆草5~20份，黄岑10~15份，五加皮5~10 份，以及芽孢杆菌、光合细菌和液体蜜糖培养基。
[0040] 实施例3 :
[0041] -种南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂，包含以下重量份的原料制成： 五倍子22~26份，杨树花14~21份，龙胆草5~20份，黄岑10~15份，五加皮5~10 份，以及芽孢杆菌、光合细菌和液体蜜糖培养基，中草药原料超微粉碎后的粉状中草药原料 组分，该粉状组分占液体蜜糖培养基体积的体积百分比为15-25%，芽孢杆菌的接种量占液 体蜜糖培养基体积的体积百分比为2-3%，活菌数为2X IO9-I X 101(lcfu/ml，上述光合细菌 接种量占液体培养基体积的体积百分比为4-5 %，活菌数为3 X 108-5 X 108cfu/ml，液体蜜 糖培养基由水和液体蜜糖组成，其中液体蜜糖占液体蜜糖培养基体积的10% -20%。
[0042] 实施例4 :
[0043] 一种南美白对虾抗运输应激的中草药微生态制剂，该微生态制剂中的活菌数或细 胞数彡2 X 107cfu/ml，由以下重量份的原料制成：五倍子22~26份，杨树花14~21份，龙 胆草5
文档序号 :
【 8418624 】
技术研发人员：王蔚淼,齐振雄,张家学
技术所有人：清远海贝生物技术有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
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