油菜花粉水溶性提取物及其制备方法与应用
[0058] 油菜花粉水溶性提取物保健糖浆的制备
[0059] 实施例9
[0060] 取按照实施例1-4的方法制备的油菜花粉水溶性提取物500g，加2000ml饮用水， 在70°C条件下加热浸提2小时，离心，取上清液，加入适量的乳酸钙及VC、VE，混匀即得保健 糖浆。
[0061 ] 油菜花粉水溶性提取物提高免疫力，抗衰老实验研究
[0062] 实施例10
[0063] 1.材料与方法
[0064] I. 1 试剂
[0065] 按照实施例1-4的技术方案制备油菜花粉水溶性提取物（YCH)，给药前在提取物 中加蒸馏水配制成浓度分别为2. 5mg/mL、5mg/mL、10mg/mL的低、中、高浓度药液。
[0066] 丙二醛（MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)试剂盒、过氧化氢酶试剂盒（CAT):南京建成生物工程研究所；香菇多糖注射液： 江苏康缘药业股份有限公司；
[0067] 1.2分组、造模及给药
[0068] 昆明种小鼠60支，体重28~32g，雌雄各半。小鼠随机分为6组，每组10只，分别 为空白组、模型组、香菇菌多糖组（阳性组）和油菜花粉水提物低、中、高剂量组。除空白组 外其他组的小鼠均颈背部皮下注射D-半乳糖120mg/kg，连续60天，同时各组分别灌胃给予 相应的药物，空白和模型组给予等体积蒸馏水，阳性药组给予香菇菌多糖l〇〇mg/kg，油菜花 粉水提物低、中、高剂量组分别给予提取物50、100、200mg/kg，给药体积为20mL/kg · d。
[0069] I. 3指标测定
[0070] 1. 3. 1小鼠胸腺和脾脏指数的测定
[0071] 末次给药24h后，称小鼠体重，眼眶取血后处死小鼠，取胸腺、脾脏、肝脏和脑组织 并称重。以脏器湿重（mg)/体重（g)、计算胸腺指数和脾脏指数。
[0072] 1. 3. 2小鼠血MDA含量及SOD活力测定
[0073] 将小鼠血液立即离心取血清，按MDA试剂盒、SOD试剂盒说明书操作。分别测定血 清中MDA、SOD含量。
[0074] 1. 3. 3小鼠肝组织GSH-Px活力测定
[0075] 取小鼠肝脏，加预冷的生理盐水制备成10%的组织匀浆。冷冻离心（2°C~4°C )， 取上清液，用谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒（南京建成生物工程研究所）测定谷胱甘肽过氧 化物酶活力。
[0076] 1. 3. 4小鼠脑组织CAT活力测定
[0077] 取小鼠脑组织，加预冷的生理盐水进行匀浆制备成10 %的组织匀浆。冷冻离心，取 上清液，用过氧化氢酶试剂盒测定过氧化氢酶活力。
[0078] 2.结果
[0079] 2. 1油菜花粉提取物对衰老小鼠胸腺和脾脏指数的影响
[0080] 与空白组相比，模型组胸腺指数和脾脏指数均有显著性降低（P〈0. 05);与模型组 相比，香菇菌多糖组及油菜花粉水提物低、中、高剂量组胸腺指数和脾脏指数均有显著性升 高（Ρ〈0·05，Ρ〈0·01)，见表 2。
[0081] 表2油菜花粉水提物对衰老小鼠胸腺和脾脏指数的影响（ , η = 10)
[0083]注：与空白组相比，#Ρ〈0· 05, ##Ρ〈0· 01 ;与模型组相比，Ρ〈0· 05, Ρ〈0· 01。
[0084] 2. 2油菜花粉水提物对衰老小鼠 MDA含量和SOD、GSH-Px、CAT活力的影响
[0085] 与空白组相比，模型组MDA含量有显著性升高（Ρ〈0· 05)，S0D、GSH-Px、CAT活力明 显降低（p〈0. 05);与模型组相比，香菇菌多糖组及油菜花粉水提物低、中、高剂量组MDA含 量有显著性降低（P〈〇. 05)，SOD和GSH-Px活力均明显提高（P〈0. 01)，香菇菌多糖组及油菜 花粉水提物中、高剂量组CAT活力显著提高（P〈0. 01)，见表3。
[0086] 表3油菜花水提物对衰老小鼠 MDA含量和SOD、GSH-Px、CAT活力的影响（X.±j， η = 10)
[0088] 注：与空白组相比，#Ρ〈0· 05, ##Ρ〈0· 01 ;与模型组相比，Ρ〈0· 05, Ρ〈0· 01。
[0089] 3.结论
[0090] 油菜花粉水提物能显著提高衰老模型小鼠胸腺指数和脾脏指数，明显降低MDA含 量；显著提高S0D、GSH-Px、CAT活性。提示油菜花粉水提物可通过增强机体免疫功能、提高 机体抗氧化能力和直接清除自由基等发挥其延缓衰老的作用。
[0091] 油菜花粉水溶性提取物降血脂实验研究
[0092] 实施例11
[0093] 1.材料与方法
[0094] I. 1 试剂
[0095] 取按照实施例1-4的技术方案制备的油菜花粉水溶性提取物，给药前加蒸馏水配 制成浓度为3. 5mg/mL、7mg/mL、14mg/mL的低、中、高浓度药液。阿伐他汀，北京嘉林药业股 份有限公司。
[0096] 1.2分组、造模及给药
[0097] Wistar大鼠48只，体重180g~200g，雄性。随机分成6组，每组8只，即空白组、 模型组、阿伐他汀组，油菜花粉水提物低剂量组、油菜花粉水提物中剂量组、油菜花粉水提 物高剂量组。除空白组饲以正常饲料外，其他各组均给予饲喂高脂饲料（1%胆固醇、0.5% 胆酸钠，10%猪油、10%鸡蛋黄粉、78. 5%基础饲料）15天造模。同时各组分别灌胃给予相 应的药物，空白和模型组给予等体积蒸馏水，阳性药组给予阿伐他汀3mg/kg，油菜花粉水提 物低、中、高剂量组分别给予提取物35、70、140mg/kg，给药体积为10mL/kg · d。
[0098] 各组大鼠自由摄食与饮水，每天记录摄食及饮水量。15d后禁食过夜（12h)，次日 称重后，断头取血，取血清待测。
[0099] L 3指标测定
[0100] 总胆固醇（TC)、甘油三酯（TG)、高密度脂蛋白（HDL-C)、低密度脂蛋白（LDL-C)直 接用全自动血液生化分析仪测定。
[0101] 2.结果
[0102] 2. 1油菜花粉水提物对高脂血症大鼠体重的影响
[0103] 实验中各组大鼠生长良好，体重均表现出逐渐增长的趋势。模型组大鼠体重显著 高于空白组，而模型组与三个剂量组之间体重无显著差异，说明油菜花粉水提物对大鼠体 重无异常影响。
[0104] 2. 2油菜花粉水提物对高脂血症大鼠血脂水平的影响
[0105] 结果见表4,模型组大鼠血清的TC、TG、LDL-C水平显著高于空白组大鼠（P〈0. 01)， 而HDL-C明显下降（P〈0. 05)，表明实验大鼠的高脂模型复制成功。油菜花粉水提物高、中剂 量能显著降低高脂血症的TC、LDL-C水平（P〈0. 05)，三个剂量组能明显降低高血脂症大鼠 的 TG 水平（Ρ〈0· 01，Ρ〈0· 05)，增加 HDL-C 水平（Ρ〈0· 01，Ρ〈0· 05)。
[0106] 表4油菜花粉水提物对高脂血症大鼠血脂水平的影响（, η = 8)
[0108] 注：与空白组相比，#Ρ〈0. 05, ##Ρ〈0. 01 ;与模型组相比广Ρ〈0. 05, **Ρ〈0. 01。
[0109] 3 结论
[0110] 油菜花粉水提物能够降低高脂血症大鼠的TG、TC、LDL-C水平，同时增加高脂血症 大鼠 HDL-C水平，有望开发成降脂药物。
[0111] 以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。
【主权项】
1. 制备油菜花粉水溶性提取物的方法，包括以下步骤： 1) 直接将油菜花粉与水混合，常温搅拌，制得混合物水溶液； 2) 将所得混合物水溶液进行抽滤或离心，分别得滤液或上清液和沉淀物； 3) 将所得滤液或上清液经浓缩，得浓缩液； 4) 将浓缩液干燥，得油菜花粉提取物。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的油菜花粉与水以1:1~ 1:15的体积比混合，所述搅拌的时间为2~6小时，优选的搅拌的时间为4小时。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的抽滤为真空抽滤，所述的离 心为3000~6000r/min离心10~30min;优选的，所述的离心为6000r/min离心lOmin。4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)所述的浓缩为减压浓缩。5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所述的干燥为鼓风干燥、板式真空 干燥、带式真空干燥或微波真空干燥。6. 根据权利要求1-5任一项所述的方法制备的油菜花粉水溶性提取物，其特征在于所 述水溶性提取物含有多糖类物质，所述多糖类物质的单糖组成为甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄 糖醛酸、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖及鼠李糖。7. -种制剂，其含有权利要求6所述的油菜花粉水溶性提取物和药学可接受的赋形 剂。8. 根据权利要求7所述的制剂，其包括但不仅限于胶囊、颗粒剂、片剂、膏剂或丸剂。9. 一种保健食品，其含有权利要求6所述的油菜花粉水溶性提取物和食用辅料。10. 根据权利要求9所述的保健食品，其包含但不仅限于软糖、糖浆或饮料。11. 根据权利要求6所述的油菜花粉水溶性提取物在制备调节免疫、降血脂、抗衰老的 药物、保健品或食品中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种油菜花粉水溶性提取物及其制备方法和应用，该制备方法包括：1)直接将油菜花粉与水混合，常温搅拌，制得混合物水溶液；2)将所得混合物水溶液进行抽滤或离心，分别得滤液或上清液和沉淀物；3)所得滤液或上清液经浓缩，得浓缩液；4)将浓缩液干燥，得油菜花粉提取物。本发明方法操作简单，降低成本。按照本发明方法制得的水溶性提取物富含利于人体吸收的活性成分，能够用于制备多种药品、保健品或食品，具有调节免疫、降血脂、抗衰老等功效。
【IPC分类】A23L2/38, A61K36/31, A23L33/00, A61K133/00, A61P37/02, A23G3/48, A61P3/06, A61P39/06
【公开号】CN105326880
【申请号】CN201510827862
【发明人】萧伟, 李璐, 朱兆林, 原少伟, 张红, 杨义芳, 吴云, 丁岗, 王振中
【申请人】江苏康缘药业股份有限公司
【公开日】2016年2月17日
【申请日】2015年11月25日
文档序号 :
【 9548926 】
技术研发人员：萧伟,李璐,朱兆林,原少伟,张红,杨义芳,吴云,丁岗,王振中
技术所有人：江苏康缘药业股份有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
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技术研发人员：萧伟,李璐,朱兆林,原少伟,张红,杨义芳,吴云,丁岗,王振中
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