一种小鼠酒精肝模型构建方法

本发明涉及动物模型构建，尤其涉及一种小鼠酒精肝模型构建方法。

背景技术：

1、酒精性肝病(alcohol-related liver disease,ald)已经成为世界范围内导致慢性肝病的重要原因，影响全世界约4.8％的人，且呈逐年上升的趋势。根据世界卫生组织2018年《酒精与健康全球现状报告》，每年因滥用酒精导致的死亡人数约有300万，约占全年死亡人数的6％；此外，滥用酒精还导致1.326亿残疾调整生命年损失，占全部残疾调整生命年的5.1％，给家庭和社会带来了沉重负担。随着经济的快速增长和生活方式的改变，随着饮酒人数和饮酒量的增加，ald已成为导致肝硬化或肝癌快速增长的重要原因；我国已成为全球重度饮酒人数比例最高的国家之一。ald在我国已成为仅次于非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,nafld)的第二大肝病。预计2040年，我国将有超过360万人患酒精性肝硬化，近200万例患者死于ald。ald已成为我国重要的公共健康问题之一，严重威胁我国人民健康和制约社会经济发展。

2、在过去的几十年里，已经建立了许多动物模型来研究急性和慢性酒精暴露用来模拟ald的发生和进展，但大多存在以下缺点：

3、1)只能引起血清alt和ast的轻度升高；

4、2)通过含全营养素和酒精的液体饲料喂养，口感不好，小鼠进食意愿不强烈，进食量存在差异，导致模型不稳定；

5、3)液体饲料易变质，需要每天配制，更换饲料；

6、4)技术难度高、需要重症监护和昂贵的设备。

7、因此，有必要提供一种新的小鼠酒精肝模型构建方法。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种小鼠酒精肝模型构建方法，以解决现有技术中存在的问题。

2、为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

3、一种小鼠酒精肝模型构建方法，包括以下步骤：

4、适应性饲喂：将小鼠适应性饲喂3～7天；

5、酒精灌胃：适应性饲喂结束后，对小鼠进行酒精灌胃处理，连续酒精灌胃8～15天，酒精灌胃所用酒精的体积浓度为30～35％，每天灌胃一次，灌胃剂量为4～6g/kg，优选为5g/kg；

6、酒精灌胃结束后即得到小鼠酒精肝模型。

7、其中，适应性饲喂即pbs/生理盐水进行灌胃适应；同时正常提供营养均衡的鼠粮；在酒精灌胃期间同样需提供营养均衡的鼠粮，确保小鼠能够获得足够的蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质等。

8、进一步地，所用小鼠的年龄为9-10周龄。

9、进一步地，所用小鼠为雌性icr小鼠。

10、进一步地，所用小鼠的体重为29-31g。

11、进一步地，所用酒精的配置为将浓度为95％的酒精与三次蒸馏水混合，配置得到体积浓度为30～35％的酒精。

12、进一步地，所用酒精的体积浓度为31.35％。

13、进一步地，酒精灌胃的时间为早上8～10点，优选为早上9点。

14、本发明有益效果至少包括：

15、本发明直接灌胃可以精确控制每次酒精给予剂量和频率，每只小鼠摄入酒精量保持一致，更易于获得稳定的模型；克服了小鼠不适应液体饲料，导致小鼠厌食，甚至死亡的结局，小鼠死亡率高容易干扰造模时长。

16、本发明具有操作简单，构建时间短，费用低，能较好地模拟ald患者饮酒模式和发病过程，且具有小鼠进食量平稳、重复性好、肝脏损伤明显等优点。本模型解决了小鼠厌恶液体饲料以及酒精挥发快等关键问题。本发明构建的模型，为ald的研究提供了稳定的模型和初步探索。

1.一种小鼠酒精肝模型构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的小鼠酒精肝模型构建方法，其特征在于，所用小鼠的年龄为9-10周龄。

3.根据权利要求1所述的小鼠酒精肝模型构建方法，其特征在于，所用小鼠为雌性icr小鼠。

4.根据权利要求1所述的小鼠酒精肝模型构建方法，其特征在于，所用小鼠的体重为29-31g。

5.根据权利要求1所述的小鼠酒精肝模型构建方法，其特征在于，所用酒精的配置为将浓度为95％的酒精与三次蒸馏水混合，配置得到体积浓度为30～35％的酒精。

6.根据权利要求5所述的小鼠酒精肝模型构建方法，其特征在于，所用酒精的体积浓度为31.35％。

7.根据权利要求1所述的小鼠酒精肝模型构建方法，其特征在于，酒精灌胃的时间为早上8～10点。