一种宫颈脱落细胞保存液的制作方法

本发明涉及细胞保存液，具体涉及一种宫颈脱落细胞保存液。

背景技术：

1、在临床上采集宫颈脱落细胞时，采集部位多为病变部位，因此采集的样本中时常携带大量的粘液和血液等杂质，容易对细胞涂片观察或是核酸提取产生一定的困扰。具体的，对样本离心富集细胞后因大量红细胞和一些粘液胶冻样物的存在会影响观察细胞沉淀及有效细胞层的判别，加大细胞分离和制片的难度。另外，在对细胞涂片观察方面，即对镜下细胞判读时，粘液会包裹细胞及杂质，影响细胞在玻片上的平铺效果；而血液中的红细胞，会覆盖部分病理细胞，造成背景复杂，减少病理细胞镜下数量。因此，粘液和红细胞都会使判读者无法清晰地观察细胞数量和形态，进而影响判读。在核酸提取方面，大量的粘液会造成细胞和上清液难以分离，细胞不易沉淀和吸取，导致提取的核酸浓度低，质量差；而大量的红细胞由于含有血红素，也会影响核酸的提取，并且会对后续的pcr反应产生抑制作用，影响结果判读。

2、目前的细胞保存液主要是针对细胞形态的整体保存，而对细胞dna完整性保存的细胞保存液产品较少，且不具备分解粘液和红细胞的前处理功能。因此，在进行细胞实验时还需对样本进行额外的前处理，不仅使得操作复杂，延长实验时间，还容易出现人为误差干扰结果准确性。

3、另外，即使部分细胞保存液产品能够保存细胞dna的完整性，却不能保存细胞的完整性。若同时进行细胞涂片观察和核酸检测，则需要分别采样，会给临床及患者带来不便。

4、再有，常规的细胞保存液没有自清洁能力，无法分解粘液和血液中的红细胞，使得样本杂质过多，前处理难度增加。

5、综上所述，需要提供一种宫颈脱落细胞保存液以解决现有细胞保存液产品存在的无法兼顾细胞形态完整性和dna完整性的保存能力，以及不具备对粘液和血液中红细胞分解的自清洁能力的问题。

技术实现思路

1、本发明目的在于提供一种宫颈脱落细胞保存液，具体技术方案如下：

2、一种宫颈脱落细胞保存液，包括以下重量份数的原料组分：7.4-13.3份细胞保存剂、1-5份粘液处理剂、0.5-4.5份细胞分散剂、6.2-12份红细胞裂解剂和960.2-983.9份基液；所述粘液处理剂包括羧甲基半胱氨酸；所述细胞分散剂包括tritonx-100。

3、可选的，所述红细胞裂解剂包括以下重量份数的原料组分：6-8份nh4cl，0.1-1份khco3和0.1-3份na2edta。

4、可选的，所述细胞保存剂包括以下重量份数的原料组分：1-3.5份na2hpo4、0.2-0.5份kh2po4、6-9份nacl和0.2-0.3份kcl。

5、可选的，所述基液包括双蒸水。

6、可选的，所述宫颈脱落细胞保存液还包括重量份数为1-5份的防腐剂。

7、可选的，所述防腐剂包括proclin300。

8、应用本发明的技术方案，至少具有以下有益效果：

9、(1)本发明提供的宫颈脱落细胞保存液在不同温度下均能较好的保存宫颈脱落细胞的正常形态和dna的完整性，同时对粘液中的黏蛋白和血液中的红细胞具备较强的分解能力。无论是细胞学的镜下观察还是dna提取检测，不再需要额外的处理即可获得较高质量的细胞样本，不仅能节约实验时间，同时还能够实现对样本处理的标准化控制，避免人为误差对结果准确性的干扰。具体的，所述粘液处理剂采用适宜用量的羧甲基半胱氨酸，具有较强的粘液溶解能力，其分子中含巯基的氨基酸，通过巯基与粘液中的黏蛋白的二巯键互换作用，使黏蛋白分子裂解，进而实现粘液分解。所述细胞分散剂采用适宜用量的tritonx-100，能够降低细胞的附着性，辅助羧甲基半胱氨酸分解粘液且不破坏细胞的完整性；同时，tritonx-100增加细胞团的离散度，快速分离细胞，方便细胞学的镜下观察以及dna提取检测。所述细胞保存剂用于为宫颈脱落细胞提供相对稳定的离子环境和ph环境，确保宫颈脱落细胞被完整保存。所述红细胞裂解剂用于加速血液中红细胞涨破裂解，避免红细胞的存在对检测结果的影响。

10、(2)本发明中所述红细胞裂解剂中采用的nh4cl能够产生渗透压差使红细胞膨胀，由于红细胞结构相对简单，膨胀的耐受能力较差，绝大部分就会被涨破；na2edta中的edta与细胞中的镁离子和钙离子形成的螯合物主要起到破坏细胞膜稳态的作用，加速红细胞涨破；khco3用于为宫颈脱落细胞提供相对稳定的ph环境。

11、(3)本发明采用适宜用量的防腐剂proclin300，能够广谱抑制细菌、真菌等微生物的生长，持续时间较长且极少产生耐药性；防腐剂proclin300对人体安全，没有毒性，对人体皮肤和眼睛没有刺激性；防腐剂proclin300具有较高的热稳定性和化学稳定性，适用ph范围广(ph2.5～8.5)，在多种缓冲溶液均有较稳定的化学性质。

12、除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将参照图，对本发明作进一步详细的说明。

1.一种宫颈脱落细胞保存液，其特征在于，包括以下重量份数的原料组分：7.4-13.3份细胞保存剂、1-5份粘液处理剂、0.5-4.5份细胞分散剂、6.2-12份红细胞裂解剂和960.2-983.9份基液；所述粘液处理剂包括羧甲基半胱氨酸；所述细胞分散剂包括tritonx-100。

2.根据权利要求1所述的宫颈脱落细胞保存液，其特征在于，所述红细胞裂解剂包括以下重量份数的原料组分：6-8份nh4cl，0.1-1份khco3和0.1-3份na2edta。

3.根据权利要求1所述的宫颈脱落细胞保存液，其特征在于，所述细胞保存剂包括以下重量份数的原料组分：1-3.5份na2hpo4、0.2-0.5份kh2po4、6-9份nacl和0.2-0.3份kcl。

4.根据权利要求1所述的宫颈脱落细胞保存液，其特征在于，所述基液包括双蒸水。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的宫颈脱落细胞保存液，其特征在于，还包括重量份数为1-5份的防腐剂。

6.根据权利要求5所述的宫颈脱落细胞保存液，其特征在于，所述防腐剂包括proclin300。