一种断血流总皂苷的制备方法
技术领域：
本发明属于生物分离技术领域，特别是一种采用沉析法制备断血流总皂苷的方法。
背景技术：
中药断血流，为唇形科植物风轮菜与荫风轮的干燥地上部分，最初是从安徽省发 掘出来的民间使用的草药。含有皂苷类、黄酮类、氨基酸类、多糖类、酚性物质和挥发油等化 合物，主要用于治疗崩漏、子宫肌瘤出血、尿血、鼻衄、牙龈出血、刨伤出血等出血症。断血流 为70年代从民间验方筛选，经临床验证后被国家药典录入的少数几个单味药之一，其疗效 确切，安全性高，被公认为中医临床首选口服妇科止血药。皂苷类物质是断血流药材止血的 功能性成分。断血流皂苷属于三萜类皂苷，易溶于热水、稀醇，难溶于丙酮、乙醚、氯仿等溶剂。 昝丽霞发表的“超声提取_分光光度法测定断血流总皂苷含量”文献中测得皂苷2%左右。成药断血流片，《药典》明确了其提取方法和功效及鉴别证实总皂苷是功能性成 分。制法，取断血流4500g，切段，加水煎煮二次，每次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩 至相对密度为1. 15(80°C )，加1.7倍量的乙醇，充分搅拌，静置24小时，取上清液，减压浓 缩成稠膏状，干燥成干浸膏，加辅料适量，制成颗粒，压制成片功能与主治凉血止血。用 于功能性子宫出血，月经过多，产后出血，子宫肌瘤出血，尿血，便血，吐血，咯血，鼻衄，单纯 性紫癜，原发性血小板减少性紫癜等；含量测定，色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(80 20)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按醉 鱼草皂苷IV b峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取醉鱼草皂苷IV b对照品适量， 精密称定，加甲醇制成每Iml含15 μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品20片，除去 包衣，精密称定，研细，取约0. 3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇20ml，密塞，超声处理 (功率220W，频率50kHz) 15分钟，滤过.滤渣再加甲醇20ml，超声处理15分钟，滤过，合并 滤液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，移入分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次 20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的氨试液30ml洗涤，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每 次30ml，分取正丁醇液，回收至干，残渣用甲醇溶解，转移至IOOml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇勻，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μ 1，注入 液相色谱仪，测定，即得。现有提取与分离断血流皂苷所得产品含量较低，方法多是水或乙醇回流提取、萃 取、大孔树脂纯化。如张毅等发表的《大孔吸附树脂纯化断血流总皂苷工艺研究》，该文献采 用大孔树脂纯化断血流皂苷，并对比了洗脱剂的洗脱效果，含量有原来固形物的7. 7%提高 到了 11.8%。专利200510027812. 4 “中药断血流总皂苷的提取方法”，公开的方法也是采 用水提取和大孔树脂纯化。而专利200510038206. 4“中药断血流总皂苷的制备方法”，该法所得产品总皂苷大 于50%，醉鱼草皂苷大于5%，所公开的工艺是水提、醇沉、树脂纯化、硅胶氧化镁层析及正丁醇萃取等多道工序，操作繁杂。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种断血流皂苷的制备方法，该方法能够提高产品含量高，缩短生产周期。本方法之所以采用超声提取，因为超声提取速度快，能耗低。昝丽霞发表的“超声提取-分光光度法测定断血流总皂苷含量”也比较了超声提取和回流提取效果，实验结果证 实超声提取优于回流提取。本发明的目的是这样来实现的一种断血流总皂苷的制备方法，其特征在于包括以下几个步骤取断血流药材粉碎和其5-7倍量醇溶液加入频率为40-80KHZ超声波提取罐中超 声提取1-2小时，提取2-3次，合并提取液；将提取液减压浓缩至密度1. 1-1. 2加入正丁醇萃取2-3次，收集正丁醇萃取液回 收正丁醇，浓缩液加入丙酮，静置沉析；将沉析物滤出，加入正丁醇回流溶解，完全溶解后加入活性碳和氧化铝脱色，滤 过，溶液再加入丙酮，沉析，重复2-3次，干燥即得产品。步骤1)中醇溶液为甲醇或乙醇的水溶液，醇浓度50-70%。优选60%甲醇溶液。步骤2)中正丁醇用量为浓缩液的3-5倍。步骤3)中活性炭为针剂类药用活性炭，用量1_2%，氧化铝为100-200目中性氧化 铝，用量为5-8%，丙酮加入量为液体的1/10-1/5。综上所述，本发明存在以下优点50_70%醇超声提取可以减少其他成分的溶出， 提取效率高，能耗低；正丁醇萃取是除去水溶性杂质，丙酮的加入又减少了非极性成分在沉 析过程中析出；沉析溶剂选择正丁醇和丙酮有利于试剂的回收和重复利用。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取5kg断血流药材，粉碎投入超声提取罐，加入35L50%甲醇溶液，以频率40KHz 超声提取2小时，提取两2次，合并提取液滤过，减压浓缩至密度1. 2，放出液体400ml转入 萃取罐内加入1200ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加入 IOOml丙酮，搅拌均勻放置沉析，充分沉析后滤出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用900ml 正丁醇回流溶解后，再加入9g针剂活性炭和27g氧化铝脱色，滤过，滤液中加入90ml丙酮， 充分搅拌，静止沉析，溶解脱色沉析3次，真空干燥沉淀物，得产品150g总皂苷含量80%。实施例2:取5kg断血流药材，粉碎投入超声提取罐，加入35L70%甲醇溶液，以频率80KHz 超声提取1小时，提取两2次，合并提取液滤过，减压浓缩至密度1. 1，放出液体370ml转 入萃取罐内加入1500ml正丁醇充分萃取，萃取2次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加 入120ml丙酮，搅拌均勻放置沉析，充分沉析后滤出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用IOOOml正丁醇回流溶解后，再加入20g针剂活性炭和50g氧化铝脱色，滤过，滤液中加入 200ml丙酮，充分搅拌，静止沉析，溶解脱色沉析2次，真空干燥沉淀物，得产品130g总皂苷 含量82%。实施例3 取5kg断血流药材，粉碎投入超声提取罐，加入25L60%乙醇溶液，以频率60KHz 超声提取1.5小时，提取两3次，合并提取液滤过，减压浓缩至密度1. 12，放出液体380ml 转入萃取罐内加入1200ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后 加入150ml丙酮，搅拌均勻放置沉析，充分沉析后滤出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物 用IOOOml正丁醇回流溶解后，再加入7g针剂活性炭和28g氧化铝脱色，滤过，滤液中加入 IOOml丙酮，充分搅拌，静止沉析，溶解脱色沉析3次，真空干燥沉淀物，得产品145g总皂苷 含量81%。实施例4 取IOkg断血流药材，粉碎投入超声提取罐，加入60L60%甲醇溶液，以频率80KHz 超声提取1小时，提取两3次，合并提取液滤过，减压浓缩至密度1. 15，放出液体600ml转 入萃取罐内加入1800ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加 入300ml丙酮，搅拌均勻放置沉析，充分沉析后滤出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用 2000ml正丁醇回流溶解后，再加入20g针剂活性炭和IOOg氧化铝脱色，滤过，滤液中加入 300ml丙酮，充分搅拌，静止沉析，溶解脱色沉析3次，真空干燥沉淀物，得产品308g总皂苷 含量81%。实施例5 取IOkg断血流药材，粉碎投入超声提取罐，加入50L60%甲醇溶液，以频率80KHz 超声提取1小时，提取两3次，合并提取液滤过，减压浓缩至密度1. 15，放出液体580ml转 入萃取罐内加入2000ml正丁醇充分萃取，萃取3次，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇后加 入350ml丙酮，搅拌均勻放置沉析，充分沉析后滤出沉淀物，丙酮回收再利用。沉淀物用 2000ml正丁醇回流溶解后，再加入20g针剂活性炭和IOOg氧化铝脱色，滤过，滤液中加入 200ml丙酮，充分搅拌，静止沉析，溶解脱色沉析3次，真空干燥沉淀物，得产品290g总皂苷 含量82%。
权利要求
一种断血流总皂苷的制备方法，其特征在于包括以下几个步骤1)取断血流药材粉碎和其5-7倍量醇溶液加入频率为40-80KHz超声波提取罐中超声提取1-2小时，提取2-3次，合并提取液；2)将提取液减压浓缩至密度1.1-1.2加入正丁醇萃取2-3次，收集正丁醇萃取液回收正丁醇，浓缩液加入丙酮，静置沉析；3)将沉析物滤出，加入正丁醇回流溶解，完全溶解后加入活性碳和氧化铝脱色，滤过，溶液再加入丙酮，沉析，重复2-3次，干燥即得产品。
2.根据权利要求1所述断血流总皂苷的制备方法，其特征在于步骤1)中醇溶液为甲醇 或乙醇的水溶液，醇浓度50-70%。
3.根据权利要求1所述断血流总皂苷的制备方法，其特征在于步骤2)中正丁醇用量为 浓缩液的3-5倍。
4.根据权利要求1所述断血流总皂苷的制备方法，其特征在于步骤3)中活性炭为针剂 类药用活性炭，用量1-2%，氧化铝为100-200目中性氧化铝，用量为5-8%，丙酮加入量为 液体的1/10-1/5。
全文摘要
本发明涉及一种断血流总皂苷的制备方法。工艺步骤包括甲醇或乙醇溶液超声提取，正丁醇萃取2-3次，回收正丁醇，加入丙酮沉析，正丁醇回流溶解，加活性炭氧化铝去杂，加如丙酮再沉析2-3次等。采用本方法生产断血流总皂苷，能耗低、废液少、周期短、产品含量高，所得产品可以直接用作药品和保健品原料。
文档编号A61K36/53GK101804092SQ20101015609
公开日2010年8月18日 申请日期2010年4月27日 优先权日2010年4月27日
发明者刘东锋, 杨成东, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司
文档序号 :
【 992958 】
技术研发人员：刘东锋,郭琴,杨成东
技术所有人：南京泽朗医药科技有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
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