一种药物组合物的新用图
[0067] 取黄芩185g、连翘185g、赤芍185g、黄连74g、黄柏297g、甘草74g，加水煎煮3次， 合并水煎液，浓缩，静置，滤过，滤液加入适量矫味剂和抑菌剂，制备成口服液。
[0068] 以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。
[0069] 试验例1沙门氏菌病的治疗作用
[0070] 1材料和方法
[0071] 1.1药品和试剂
[0072] 本发明药物组合物(亦称肠菌清散）：由黄芩、连翘、黄连、黄柏、赤芍和甘草组方而 成?
[0073] 黄芩213g连翘213g黄连85g
[0074] 黄柏340g赤巧213g甘草85g
[0075] 12. 2制法
[0076] 以上6味，粉碎，过筛，混匀，干燥，即得。
[0077] 按照上述药材配方和制备方法，通威股份有限公司动物药业有限公司生产并提供 的三个不同批次的检验合格产品：批号20111031 ;20111032 ;20111033。该产品为黄色粉 末。临时性按设计剂量伴饲投药使用。
[0078] 环丙沙星；四川通达动物保健科技有限公司，规格：50g: lg，，批号：20120101。伴 饲投药。
[0079]鸡白痢沙门氏杆菌（Salmonellapullorum)，菌种号 CVCC519，C79-3，S.pu.2;血 清型为：9, 121，123, 购自中国兽医药品监察所；
[0080] 缓冲蛋白胨水（BP):按GB4789. 28中4. 12规定自行配制；
[0081] 氯化镁孔雀绿肉汤（MM)培养基，北京陆桥技术有限公司批号120213;
[0082] 麦康凯培养基，北京陆桥技术有限公司批号120213;
[0083] SS培养基，北京陆桥技术有限公司批号120213;
[0084] XLD培养基，北京陆桥技术有限公司批号120213;
[0085] 赖氨酸脱羧酶培养基，北京陆桥技术有限公司批号120213;
[0086] 三糖铁培养基，北京陆桥技术有限公司批号120213;
[0087] A-F多价血清，兰州生物制品研究所
[0088]1. 2试验仪器
[0089] 电子天平，成都普瑞逊电子有限公司；
[0090] 755B紫外可见分光光度计，上海菁华科技仪器有限公司；
[0091] 超净工作台，苏州安泰空气技术有限公司；
[0092] VITEK-2全自动微生物分析系统，法国生物梅里埃公司；
[0093]Genex移液枪，上海沃元科技有限公司。
[0094] 其他常规实验仪器。
[0095] 1. 3试验动物
[0096] 1日龄经MD疫苗免疫后的罗曼蛋用鸡500只，购自重庆市大足区明基家禽养殖有 限公司种鸡场。自由饮用经煮沸消毒放冷的自来水，并用不含任何抗菌药物的全价雏鸡饲 料饲养至3日龄，从中挑选出450只临床检查健康的雏鸡作为试验对象。按有重复的随机 区组设计将动物分为10组进行试验，体重及分组情况见表1。
[0097] 1.4饲料不含任何抗菌药物的全价饲料。购自正大集团重庆正大有限公司。
[0098] 表1试验鸡的分组及处理情况*
[0099]
[0100] *1、预防组为提前12h投药，治疗为感染同时给药；
[0101] 2、C代表肠菌清散组；CX代表环丙沙星组。
[0102] 1.5染毒菌液制备
[0103]鸡白痢沙门氏杆菌（C79_13)为中国兽药监察所的标准菌株。使用前先将其接种于 蛋白胨缓冲液36土 rc培养18h，再用普通平板37°C划线培养24h，挑取典型菌落接种于普 通肉汤中37°C培养18h，比浊测定细菌生长浊度，确定含菌量。将含菌量为6. 75X IO9个/ L的肉汤培养物0. 25ml 口服接种非免鸡复壮，经感染发病鸡肝脏无菌分离复壮的菌种纯化 培养后制成染毒菌液，并用麦氏比色法测得定量菌液浓度为6. 75 X IO9个/L，置4°C冰箱保 存备用。
[0104] 1. 6预试验及攻毒剂量的确定
[0105] 正式试验前，选取同场饲养并在相同条件下饲养的3日龄健康雏鸡，按文献口服 接种致病菌株，确定致病菌株的最小致死剂量MLD (IO9CFU/只)。
[0106] 沙门氏菌毒力预试，取少量菌液，用生理盐水作10倍稀释成不同浓度的菌液，分 别为原液及原液的10' 1〇_2、1〇_3浓度，取体重相近小鸡50只，分为5组，每组10只，分别口 服以上不同量或不同浓度的菌液，观察5d内鸡只发病及死亡情况并记录；5天动物的最小 致死剂量（MLD)作为本次试验用的攻毒剂量。
[0107] I. 7接种量和细菌数
[0108] 每只鸡口服接种I X MLD沙门氏菌菌液。
[0109] 1. 7用药剂量、疗程和方法
[0110] 各预防组均在接种前12h进行预防性给药；治疗组于接种后出现第一只发病鸡时 开始进行投药；感染对照组饲喂不添加任何药物的基础日粮；健康对照组隔离饲养，不作 任何处理。自由饮用经煮沸后冷却的灭菌常水；各组均连续给药5天，观察期为接种后8天。 给药剂量、方法见表1。
[0111] 1.7疗效评价指标
[0112] 1.7. 1临床观察
[0113] 动物接种后，1~8日内，逐日观察临床症状，对精神状态、呼吸状况、粪便、后肢关 节、饮水量、采食量等进行观察，并对病死鸡进行病理剖检、细菌分离鉴定，采集病死鸡只实 质器官进行病理组织观察等项内容进行试验，观察并记录试验结果。
[0114] 1.7. 2 死亡率
[0115] 凡在试验期内，经预防或治疗无效，临床出现沙门氏杆菌病典型症状并死亡，经剖 检具典型沙门氏杆菌病病变特征，细菌学分离，鉴定为阳性者，确定为感染死亡。据死亡数 计算各组死亡率。
[0116] L 7. 3 有效率
[0117] 试验结束后，各组存活动物中占试验组的百分率为有效率。
[0118] 1.7. 4 治愈率
[0119] 经用药后，动物无异常或恢复正常，无临床症状者均为治愈。据治愈数计算各组治 愈率。
[0120] 1.7. 5 采食量
[0121] 以添料量和剩料量之差计算各组采食量，并对各试验组计数，获取各组鸡只平均 采食粮。计算公式如下：各组平均日采食量（g)=(添料量-剩料量）/动物数
[0122] 1.7. 6相对增重率
[0123] 以感染试验组的平均增重与健康对照组的平均增重之比算出，计算公式如下：
[0124]
[0125] 1.7. 7细菌的分离与鉴定
[0126] 按如下检验程序对细菌进行分离鉴别：
[0127] 采样一增菌培养一鉴别培养一生化检验一血清学试验一结果报告。
[0128] 1. 7. 7. 1样本的采集与增菌培养
[0129] 剖检受试死亡鸡只，无菌分离并采集肝血、心血或腹水。选用普通肉汤培养基和氯 化镁孔雀绿肉汤（MM)培养基于37°C下增菌培养18~24h，菌液置4°C冰箱保存待检。
[0130] 1.7. 7. 2鉴别培养与细菌的生化试验
[0131] 用接种环蘸取少量增菌培养菌液，划线接种于XLD琼脂平板、麦康凯培养基上。于 37°C培养18h~24h，观察菌落特征(建议描述菌落的形态特征)。然后，自XLD琼脂平板上 分别挑取符合沙门氏菌培养特征的2个以上可疑菌落，接种在三糖铁琼脂培养基上，先在 斜面划线，再于底层穿刺；然后在接种针接种后不灭菌的情况下，直接继续接种于赖氨酸脱 羧酶试验培养基上接种培养，37°C培养18h~24h，观察菌落的生长特征。记录并报告结果。
[0132] 将疑似阳性菌株培养液在VITEK-2全自动微生物分析系统上进行生化鉴别，记录 结果。
[0133] 1.8数据分析和处理
[0134] 选用统计软件为SPSS15. 1对数据进行统计分析。死亡率、有效率用X2检验，增 重用F检验。
[0135] 2.结果
[0136] 2. 1临床结果
[0137] 雏鸡感染后4h~8h后逐渐出现不同程度的典型的雏鸡白痢临床症状，8h后，鸡只 出现死亡。临床症候主见：精神沉郁或萎顿，个别鸡只痛苦鸣叫，饮食欲下降，羽毛松乱，呼 吸增速、喘息，两翼下垂，闭眼昏睡，畏寒集聚，不愿走动，拉白色或绿色浆液状稀粪，肛门附 近或外周被粪便污染，或黏附白色粪便堵塞雏鸡肛门，雏鸡群常伴有凄厉的尖叫声，笼具内 潮湿污秽，垫纸潮湿有明显稀粪。
[0138] 死亡鸡只病理剖检主要病理特征是：肝脏充血肿大，有散在性坏死点，心脏充血， 心包积液，肺出血或充血，小肠出血，腹腔积液，后期个别雏鸡心脏出现酣酪样结节，后肢关 节肿大。卵黄吸收不良，内含干酪样物，肠道粘膜脱落，泄殖腔内有大量粘液状白色积滞物， 口腔内有大量粘液。从肝脏、腹腔、心脏等分离细菌，可鉴定为沙门氏杆菌感染。
文档序号 :
【 9254272 】
技术研发人员：肖丹,刘天强,彭衡阳,黄冠军,杨晓玲
技术所有人：通威股份有限公司
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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