一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法及应用

本发明涉及农业科学，特别是涉及一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法及应用。

背景技术：

1、我国盐碱荒地和盐碱障碍耕地总面积超过了5亿亩，其中有农业利用潜力的盐泽土2亿亩，约占全国耕地面积的10％。在耕地日趋减少和淡水资源不足的严重压力下，培养耐盐作物品种、开发利用大面积盐渍化、荒漠化土地和丰富的咸水资源发展盐土农业，已成为全球备受关注的重大课题。

2、在盐渍化土壤中，大量的盐分进入植物细胞，造成na+毒害和细胞失水，破坏了细胞中离子的分布，引起植物的离子胁迫、渗透胁迫和以氧化胁迫为主的次级胁迫。盐胁迫是限制作物生长和产量的主要环境因素。土壤中盐含量过高，可能会形成反渗透压，将根系中的水分置换出来，使根尖变褐或者干枯。土壤湿度的波动会使可溶性盐含量过高的问题进一步恶化，植株根系损伤严重，无法吸收水分和营养，导致植株出现萎蔫、黄化、组织坏死或植株矮小等症状。土壤盐分过高也会增大由绵腐病菌引起的根腐病的发生机率。因此土壤盐碱化显着降低了大多数农作物的产量。

3、筛选和种植耐盐品种是减轻土壤盐渍化危害的有效方法之一。耐盐作物品种筛选、耐盐新品种的培育，不仅能彻底改变盐碱地农业种植结构，也能改变生态环境。因此研究不同作物在盐胁迫条件下的生理反应，了解盐胁迫对作物生长的影响，筛选耐盐作物，对提高我国土地利用率，改善盐碱地，从而提高盐碱地的生产能力及经济效益具有重要意义。

4、然而，目前大多数作物是对盐分较敏感的甜土植物，因此在这些盐渍土壤中种植当前使用的栽培品种是不可行的。谷子(setariaitalica l.)作为我国传统优势作物及粮饲兼用作物，因须根粗壮、根系发达、具有较强的耐盐、耐旱能力，一直是重要的战略储备作物，在应对未来全球气候变暖及水资源匮乏方面，能够保障干旱、贫瘠地区的粮食安全和生产，具有非常重要的作用及战略意义。

5、谷子属禾本科的粮食作物，在我国种植历史悠久，可追溯到旧石器时代，主要栽培于我国的黄河流域中上游。我国具有丰富的谷子种质资源，尤其是地方品种资源多，具有广泛的遗传变异。但目前，对来源于不同地区的谷子种质进行耐盐性评价及关键指标的筛选鲜有研究，严重制约了谷子在盐碱地的推广应用。因此建立一种大规模快速筛选谷子耐盐种质的方法就尤为重要。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了克服传统筛选方法的不足，提供一种适用于实验室培养条件下，可大量快速筛选谷子苗期耐盐种质的方法，该方法能够在短期内完成大量谷子品种的耐盐性筛选，耗时短、操作简便、成本低、结果可靠。

2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案为：

3、提供了一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，包括以下步骤：

4、(1)播种前，挑选饱满的、没有受过损伤的种子作为试验材料，将试验材料播种于播种盒中，并加入营养液；

5、(2)将播种盒放置于普通光照培养箱中培养，待幼苗长至2叶1芯时进行盐胁迫处理；

6、(3)将盐胁迫处理后的谷物幼苗的叶片用去离子水冲洗干净，并将3，3-二氨基联苯胺染色液分装在容器中，加入预处理的植物组织，进行染色；

7、(4)将染色后的叶片置于乙醇固定液中，煮沸10min，冷却至室温，将叶片转入新鲜的固定液中室温过夜，之后观察。

8、进一步的，步骤(1)中，将试验材料播种于统一标准的96孔、40*60*15cm播种盒中，加入播种盒1/2的营养液。

9、进一步的，步骤(1)中，所述营养液由水培营养液ⅰ、ⅱ、ⅲ及铁盐组成；

10、所述水培营养液ⅰ的原料组成及浓度为：

11、nh4no3 90-95g/l；

12、cacl2·2h2o 4.5-5.5g/l；

13、所述水培营养液ⅱ的原料组成及浓度为：

14、nah2po4·2h2o 70-75g/l；

15、k2so4 85-90g/l；

16、所述水培营养液ⅲ的原料组成及浓度为：

17、

18、所述铁盐的原料组成及浓度为：

19、feso4·7h2o 10-14g/l；

20、na2edta·2h2o 14-16g/l；

21、所述水培营养液ⅰ、ⅱ、ⅲ及铁盐的溶剂均为水。

22、进一步的，步骤(2)中，培养条件为28℃，16h光照、8h黑暗，湿度为70％。

23、进一步的，步骤(2)中，使用nacl进行盐胁迫处理，nacl在营养液中的浓度为200mmol/l，处理时间为2d。

24、进一步的，步骤(3)中，3，3-二氨基联苯胺染色液的浓度为5mg/ml。

25、进一步的，步骤(3)中，在28℃、避光、抽真空条件下，染色12-24h。

26、进一步的，抽真空的时间为0.5-1h。

27、一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法在谷子耐盐品种鉴定、筛选和培育中的应用。

28、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

29、本发明示例的规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，采用组织化学染色法对谷子种质进行室内耐盐性鉴定，试验周期短，并且不受外界气候条件限制，花费少，初步建立了一种较为经济的、方便快速的谷子耐盐种质筛选方法，对扩大谷子的种植范围、盐碱地的开发利用具有重要意义；另外，为谷子种植提供了抗盐及敏感材料，为从谷子中挖掘耐盐基因提供了依据。

1.一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，步骤(1)中，将试验材料播种于统一标准的96孔、40*60*15cm播种盒中，加入播种盒1/2的营养液。

3.根据权利要求1所述的一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述营养液由水培营养液ⅰ、ⅱ、ⅲ及铁盐组成；

4.根据权利要求1所述的一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，步骤(2)中，培养条件为28℃，16h光照、8h黑暗，湿度为70％。

5.根据权利要求1所述的一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，步骤(2)中，使用nacl进行盐胁迫处理，nacl在营养液中的浓度为200mmol/l，处理时间为2d。

6.根据权利要求1所述的一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，步骤(3)中，3，3-二氨基联苯胺染色液的浓度为5mg/ml。

7.根据权利要求1所述的一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，步骤(3)中，在28℃、避光、抽真空条件下，染色12-24h。

8.根据权利要求7所述的一种规模化快速筛选谷子苗期耐盐性的方法，其特征在于，抽真空的时间为0.5-1h。

9.一种权利要求1-8任一项所述的方法在谷子耐盐品种鉴定、筛选和培育中的应用。